挑战有关自由基“教科书”的证据，你敢相信吗？

Free Radical Research（IF：3.058）

氧是人体不可缺少的物质，能够参与人体新陈代谢。在线粒体中，糖类、脂肪和氨基酸都需要通过氧化释放能量，来维持人体正常生命活动。线粒体在进行有氧呼吸的过程中，除了产生CO₂、H₂O等副产物以外，也会由于氧化呼吸链的电子泄漏而产生一种活性氧自由基（ROS）。

据相关文献报道，ROS与人体疾病密不可分，例如介导炎症反应的发生,参与神经系统疾病的发展和恶化等等，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。目前，人们普遍达成共识，即ROS的产生和清除是在细胞内完成，通过抗氧化酶和抗氧化剂组成的抗氧化机制维持着细胞内的动态平衡。难道这个就是线粒体泄漏的电子的唯一的命运吗？

于是，浙江省生物化学与分子生物学学会浙江工商大学团队联合福州大学、中山大学等多家单位的专家教授展开了多年研究，最终结果令人兴奋，得到了一系列挑战有关自由基“教科书”定论的证据！

在正式揭晓证据之前，为大家简单介绍一些实验方法。

本研究以3只7岁雄性食蟹猕猴、50只雄性SD大鼠、10只雄性C57BL/6小鼠、20只雄性Mito-cpYFP 转基因小鼠作为研究模型。手术前5天动物被安置在25℃、12h光/暗循环条件下，随意获取水和食物。实验通过给动物静脉注射荧光标记物Mito-SOX与DCFH-DA，来观察ROS在生物体内的分布情况（具体步骤见原文）。实验结果用SPSS 15.0和R version 2.9.0进行统计分析。

证据一：推翻“教科书”定论，确定ROS的另一去处

如前所言，人们将“ROS的产生和清除是在细胞内完成”视为毋庸置疑的定论，而本研究的结果却揭开了ROS的另一去处。

从图1看出，猴子全身荧光分布出现与中医经络类似的分布和走向，特别出现在面部筋膜、心包、白线、硬脑膜区可见荧光、背腱膜、会阴中央腱，这些部位周围都有致密的结缔组织，且与中医所讲的眼眶、人中、牙龈、心包、任脉、神阙等重要的部位相对应。“人中”被中医视为人体重要部位，被广大民众认为是救命的最后一棵稻草，恰恰在猴子荧光分布中类似人中的位置也是非常显著的。这种系统性的存在证明，ROS不仅仅存在于细胞内，也会分布在生物体的结缔组织系统的胶原蛋白纤维中，而结缔组织系统构成了生物体的代谢相关电路。

      图1将荧光染料DCFH-DA和MitoSOX通过静脉注射到食蟹猴体内。面部筋膜(a、b)、心包(c、d)、白线(e、f)、硬脑膜区可见荧光(g、h)、背腱膜(i、j)、会阴中央腱(k、l)等身体部位致密结缔组织。

      图2雄性SD大鼠的前腹内壁图像，其腹壁被切开(a)； (b、d、f)为通过尾静脉注射1 mL DCFH-DA溶液30min后；(c、e、g)为前腹白线区域的横断面活检样本。

      图3食蟹猴腹白线的免疫组化染色，分别为ROS 分布(a)、细胞核 (b)、胶原蛋白 (c)、TEM显影的胶原蛋白分布 (e)

      图4将腹部肌层移除体外，本体连接部位为，上面为剑突，下面为耻骨联合处，腹部肌层连接位置分别为B无连接、C连接在中线位置、D连接在左右两侧、E连接在左侧上下位置、F连接在右侧上下位置、G连接左下右上位置。

       图5测定3组C57BL/6小鼠的剑突与耻骨联合部位的电流，1 h后滴加300 mL去离子水或者10Mm的H₂O₂

       最后由小编来简单总结一下：